DOI: 10.1051/rnd:2001121

Reprod. Nutr. Dev. 41 (2001) 181-186

Comparison of the effect of two different handling media on rabbit zygote developmental ability

María José Escribá, Miguel Á. Silvestre, Ayman M. Saeed and Fernando García-Ximénez

Animal Reproduction and Biotechnology Laboratory, Department of Animal Science, Universidad Politécnica de Valencia, Valencia, Spain

(Received 23 October 2000; accepted 15 February 2001)

Abstract
Despite the attention paid to culture media, the relevance of the handling medium at egg recovery/transfer is frequently overlooked. In the present work, we compare the effect of two different handling media (PBS and HEPES-buffered Ham F10, both supplemented with 20% (v/v) FCS), upon in vitro and in vivo developmental ability of in vivo fertilised rabbit zygotes. Zygotes recovered in HEPES-buffered medium (permanence 1 h as maximum) and subsequently cultured in vitro developed more efficiently to the compacted morula (100% ) and blastocyst stage (92% ) than those recovered in PBS (83% and 76% , respectively, P < 0.05). Zygotes recovered in such media were then further bilaterally transferred to recipient does following a brief in vitro culture period (for 4 hours). At caesarean section (day 28 of pregnancy), significant differences were observed in both the percentage of pregnant uterine horns (PBS: 60% vs. HEPES-buffered Ham F10: 100% ) and live birth rates (PBS: 14% vs. HEPES-buffered Ham F10: 34% ). Thus when early rabbit zygotes must be handled, even for short incubation periods, the medium is not innocuous.

Résumé
Comparaison entre deux milieux de récupération et de manipulation des ovocytes de lapine sur leur capacité ultérieure de développement. Malgré l'attention prêtée aux milieux de culture, il est fréquent d'oublier l'importance du milieu de manipulation lors de la récupération ou du transfert des oeufs. Dans ce travail, nous comparons l'effet exercé par deux milieux de manipulation différents (PBS et HEPES-buffered Ham's F10, tous deux additionnés de 20 % SVF) sur la capacité de développement in vivo et in vitro des zygotes fécondés in vivo. Les zygotes récupérés dans le milieu tamponné par l'HEPES (1 h de permanence au maximum) et cultivés in vitro présentaient un meilleur développement jusqu'aux stades morula (100 % ) et blastocyste (92 % ) que les zygotes récupérés dans le PBS (83 % et 76 % , respectivement, P < 0,05). Dans la seconde expérience, l'effet du milieu de manipulation des zygotes sur le développement in vivo a été étudié jusqu'à la naissance. Les zygotes récupérés dans ces deux milieux ont été transférés bilatéralement dans des lapines receveuses après une période de culture in vitro de 4 heures. Après la césarienne à 28 jours de gestation, des différences significatives ont été observées pour les taux de gestation (PBS: 60 % vs. HEPES-buffered Ham's F10 : 100 % ) et pour le nombre de jeunes nés vivants (PBS : 14 % vs. HEPES-buffered Ham's F10 : 34 % ). En conclusion, quand les zygotes doivent être manipulés, même pour une courte période de temps, le milieu n'est pas inoffensif.

Key words: culture media / buffer system / development / zygote / rabbit

Mots clés : milieu de culture / système tampon / développement / zygote / lapin

Correspondence and reprints: María José Escribá
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